MELHORAMENTO GENÉTICO DE PALMEIRAS: VALIDAÇÃO METODOLÓGICA DE TÉCNICAS DE DESCONTAMINAÇÃO EM CULTURAS DE EMBRIÕES ZIGÓTICOS E SUA INFLUÊNCIA NA ATIVIDADE MORFOGENÉTICA SOB EFEITO DE INDUTORES AUXÍNICOS
Nome: BIANCA GOMES BATISTA
Data de publicação: 28/07/2023
Banca:
Nome |
Papel |
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| RODRIGO SOBREIRA ALEXANDRE | Orientador |
Resumo: As condições assépticas são necessárias para evitar as contaminações que ocorrem in vitro, sejam estas nas instrumentações, recipientes e meios de culturas puras, para isso são utilizados agentes desinfetantes químicos e físicos na eliminação dos microrganismos. As placas de Petri de polietileno são descartáveis que geram resíduos sólidos e, consequentemente, lixo. Portanto,
é necessário criar protocolos eficazes para descontaminação desse material, visando a reutilização e diminuição de resíduos. Os meios de cultura normalmente são esterilizados com o uso de autoclavagens, entretanto, determinados reguladores de crescimento (RC), do grupo das auxínas, degradam na presença de altas temperaturas, o que gera uma dúvida sobre a estabilidade química dos demais RC pertencente a este grupo. Objetivou-se com esse trabalho criar métodos de esterilização de placas de Petri de polietileno e meio de cultura com diferentes indutores auxínicos, tendo como plantas teste embriões zigóticos das palmeiras Euterpe edulis, Euterpe edulis ecótipo Santa Marta e Euterpe oleracea. O experimento 1, foi conduzido em um fatorial 4x4 (Hipoclorito de sódio (NaOCl): 0; 6; 12; 24h x Luz ultravioleta (UV): 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 h), com quatro repetições de 10 placas cada. O experimento 2, foi conduzido com três tratamentos de luz UV (4; 6; 10 h), com quatro repetições de oito placas cada. O experimento 3, foi conduzido em um fatorial 2x5 (Dicloroisosianurato de sódio (NaDCC): 0; 24 h x UV: 6; 12; 18; 24; 36 h), com quatro repetições de oito placas cada. O experimento 4, foi conduzido em um fatorial 2x3 (MS: sem autoclavar; autoclavado x Distância da luz UV: 10; 30; 50 cm), com quatro repetições de cinco placas cada. O experimento 5, foi conduzido com cinco tratamentos de luz UV (1; 2; 3; 4; 5 h), com quatro repetições de oito placas cada. O experimento 6, foi conduzido em um fatorial 3x4 (palmeiras: Euterpe edulis; Euterpe edulis ecótipo Santa Marta; Euterpe oleracea x picloram filtrado; triclopir filtrado; picloram autoclavado; triclopir
autoclavado). A combinação de NaDCC (24 horas) e UV (3 horas) de exposição são ideais para alcançar uma eficaz eliminação de microrganismos em placas de Petri descartáveis. O uso de placas de Petri desinfestadas com NaDCC (1%) por 24 horas, contendo meio autoclavado e não autoclavado mostraram que a distância de 50 cm resultou em ausência ou baixa taxa de contaminações. O protocolo de esterilização do meio de cultura e das placas de Petri usando NaDCC e luz UV resultou em ausência ou baixa incidência de contaminações. As espécies demonstraram comportamentos distintos sob influência das mesmas concentrações de reguladores de crescimento, o estudo revelou que o E. edulis e E. edulis ecótipo Santa Marta apresentou uma maior responsividade à indução de embriogênese somática em comparação com a espécie E. oleracea.
