MELHORAMENTO GENÉTICO DE PALMEIRAS: VALIDAÇÃO
METODOLÓGICA DE TÉCNICAS DE DESCONTAMINAÇÃO EM CULTURAS DE EMBRIÕES ZIGÓTICOS E SUA INFLUÊNCIA NA ATIVIDADE MORFOGENÉTICA SOB EFEITO DE INDUTORES AUXÍNICOS
Nome: BIANCA GOMES BATISTA MUÑOZ
Tipo: Dissertação de mestrado acadêmico
Data de publicação: 28/07/2023
Orientador:
Nome |
Papel |
|---|---|
| RODRIGO SOBREIRA ALEXANDRE | Orientador |
Banca:
| Nome |
Papel |
|---|---|
| ADÉSIO FERREIRA | Orientador |
| LUCIANO BESTETE OLIVEIRA | Examinador Externo |
| RODRIGO SOBREIRA ALEXANDRE | Orientador |
Resumo: As condições assépticas são necessárias para evitar as contaminações que
ocorrem in vitro, sejam estas nas instrumentações, recipientes e meios de
culturas puras, para isso são utilizados agentes desinfetantes químicos e
físicos na eliminação dos microrganismos. As placas de Petri de polietileno são
descartáveis que geram resíduos sólidos e, consequentemente, lixo. Portanto,
é necessário criar protocolos eficazes para descontaminação desse material,
visando a reutilização e diminuição de resíduos. Os meios de cultura
normalmente são esterilizados com o uso de autoclavagens, entretanto,
determinados reguladores de crescimento (RC), do grupo das auxínas,
degradam na presença de altas temperaturas, o que gera uma dúvida sobre a
estabilidade química dos demais RC pertencente a este grupo. Objetivou-se
com esse trabalho criar métodos de esterilização de placas de Petri de
polietileno e meio de cultura com diferentes indutores auxínicos, tendo como
plantas teste embriões zigóticos das palmeiras Euterpe edulis, Euterpe edulis
ecótipo Santa Marta e Euterpe oleracea. O experimento 1, foi conduzido em um
fatorial 4x4 (Hipoclorito de sódio (NaOCl): 0; 6; 12; 24h x Luz ultravioleta (UV):
0,5; 1,0; 1,5; 2,0 h), com quatro repetições de 10 placas cada. O experimento
2, foi conduzido com três tratamentos de luz UV (4; 6; 10 h), com quatro
repetições de oito placas cada. O experimento 3, foi conduzido em um fatorial
2x5 (Dicloroisosianurato de sódio (NaDCC): 0; 24 h x UV: 6; 12; 18; 24; 36 h),
com quatro repetições de oito placas cada. O experimento 4, foi conduzido em
um fatorial 2x3 (MS: sem autoclavar; autoclavado x Distância da luz UV: 10; 30;
50 cm), com quatro repetições de cinco placas cada. O experimento 5, foi
conduzido com cinco tratamentos de luz UV (1; 2; 3; 4; 5 h), com quatro
repetições de oito placas cada. O experimento 6, foi conduzido em um fatorial
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3x4 (palmeiras: Euterpe edulis; Euterpe edulis ecótipo Santa Marta; Euterpe
oleracea x picloram filtrado; triclopir filtrado; picloram autoclavado; triclopir
autoclavado). A combinação de NaDCC (24 horas) e UV (3 horas) de
exposição são ideais para alcançar uma eficaz eliminação de microrganismos
em placas de Petri descartáveis. O uso de placas de Petri desinfestadas com
NaDCC (1%) por 24 horas, contendo meio autoclavado e não autoclavado
mostraram que a distância de 50 cm resultou em ausência ou baixa taxa de
contaminações. O protocolo de esterilização do meio de cultura e das placas
de Petri usando NaDCC e luz UV resultou em ausência ou baixa incidência de
contaminações. As espécies demonstraram comportamentos distintos sob
influência das mesmas concentrações de reguladores de crescimento, o estudo
revelou que o E. edulis e E. edulis ecótipo Santa Marta apresentou uma maior
responsividade à indução de embriogênese somática em comparação com a
espécie E. oleracea.
